Лабораторная диагностика панкреатита

У больных острым и хроническим панкреатитами исследуют кровь, мочу, слюну, каловые массы, дуоденальное и перитонеальное содержимое.

При исследовании гемограммы больных с острым и хроническим панкреатитом (рецидивирующая форма) могут быть обнаружены лейкоцитоз со сдвигом лейкоцитарной формулы влево до нейтрофильных гранулоцитов, эозинофилия, увеличение СОЭ. Иногда при тяжелых формах хронического панкреатита развивается гипохромная анемия и лейкопения, особенно при нарушении кишечного всасывания.

При биохимическом исследовании крови больных с острым и хроническим рецидивирующим панкреатитами отмечаются повышение уровней а₁- и а₂-глобулинов, уменьшение количества альбумина, снижение альбумин-глобулинового коэффициента и определяется активность С-реактивного белка.

У больных острым и хроническим панкреатитами в стадии обострения может нарушаться электролитный обмен, что проявляется снижением в крови количества натрия и кальция, повышением уровня калия при нормальном содержании магния. Однако, учитывая этиологическую роль гиперкальциемии в развитии острого и хронического рецидивирующего панкреатитов при аденоматозе паращитовидных желез, сопровождающемся увеличением содержания в крови паратгормона, становится понятно, что некоторые его формы сопровождаются гиперкальциемией.

При билиарном панкреатите, выраженном отеке и фиброзе головки поджелудочной железы могут наблюдаться упорная гипербилирубинемия, увеличение уровня щелочной фосфатазы в крови, а при сопутствующем хроническом неспецифическом реактивном гепатите нарастает тимоловая проба.

Для диагностики острого и хронического рецидивирующего панкреатитов, сопровождающихся аутолизом ткани поджелудочной железы, используют повышение содержания аланин (АлАТ) и аспартатаминотрансферазы (АсАТ) в крови. Повышение уровня трансаминаз в крови не специфично для поражений поджелудочной железы и поэтому определение их активности при панкреатитах ограничено. Наибольшее диагностическое значение имеет выявление повышенного уровня АсАТ, наблюдаемого при билиарных панкреатитах и сочетанных гепатитах, например, при злоупотреблении алкоголем.

Для диагностики заболеваний поджелудочной железы применяют иммунологические методы, которые можно разделить на три группы:

1. Определение содержания нормальных и измененных антигенов ткани, а также отдельных составных компонентов поджелудочной железы в крови и биологических жидкостях.
2. Определение количества антител или сенсибилизированных лимфоцитов против антигенов поджелудочной железы или ее отдельных компонентов, комплексов антиген - антитело как показателей иммунного ответа.
3. Определение иммунологических показателей, характеризующих состояние клеточного и гуморального иммунитета, степень реактивности иммунной системы.

При патологических состояниях поджелудочной железы часто продуцируется и поступает в кровоток избыточное количество различных ее антигенных компонентов, определение содержания которых может служить диагностическим тестом.

У части больных под влиянием различных физико-химических или биологических факторов некоторые продукты поджелудочной железы синтезируются в измененном виде, отличаясь от нормальных тканевых компонентов иммунологически. Избыточное поступление в кровь нормальных или измененных компонентов является не только основанием для диагностических тестов, но часто и причиной возникновения в организме иммунного ответа, результатом которого является хронизация и рецидивирование панкреатитов. Развитие иммунной реакции при заболеваниях поджелудочной железы связано в основном с эндогенными антигенами - ее тканевыми компонентами.

Для выявления антигена поджелудочной железы в крови больных панкреатитом применяются легко воспроизводимые серологические методы. Выявление антигена характерно для острой фазы болезни, при стихании патологического процесса он обычно не обнаруживается в крови. Частота выявления антигена поджелудочной железы при панкреатите зависит от стадии и формы заболевания. При отечном панкреатите и обострении хронического он обнаруживается в 50-60% случаев, а при ремиссии хронического панкреатита - в 33,3%.

Большинство клинико-иммунологических исследований при панкреатитах связаны с выявлением антипанкреатических антител для установления диагноза и течения заболевания. В крови больных с острыми формами панкреатитов часто обнаруживаются антипанкреатические антитела.

На выраженность антителообразования косвенно указывает и уровень IgG, IgA и IgM в крови. У больных острым панкреатитом отмечается повышение уровня IgM в крови и увеличение содержания циркулирующих иммунных комплексов, содержащих преимущественно IgM. У большинства больных иммунные комплексы при панкреатите способствуют элиминации поврежденной ткани, ферментов, но не исключена возможность, что при длительной циркуляции в крови, наоборот, могут осложнять патологический процесс.

Для характеристики Т-системы (клеточного звена иммунитета) определяют количество Т-лимфоцитов и их субпопуляций в крови, способность лимфоцитов под воздействием митогенов дифференцироваться в бласты, проводят также кожные тесты. Отрицательная реакция на туберкулин, трихофитии, динитрохлорбензол и другие антигены свидетельствует обычно о сниженной реактивности организма больного. Количество Т-лимфоцитов, а также их способность реагировать на фитогемагглютинин снижаются при тяжелых формах панкреатита. Постепенная нормализация этих показателей свидетельствует о ремиссии болезни.

При исследовании иммунологических изменений у больных хроническим панкреатитом выявлено снижение бактерицидных свойств сыворотки крови, прогрессирующее в процессе лечения. Отмечена высокая сенсибилизация к микробным антигенам - кишечной палочке, стрептококку, стафилококку. Обнаружено повышение содержания IgA и IgM в крови. В то же время оказалась сниженной функция Т-системы - уменьшение количества Т-лимфоцитов (в реакции спонтанного розеткообразования) и их функциональной активности (снижение индекса стимуляции в реакции бластной трансформации лимфоцитов с фитогемагглютинином). Возможно, с этим связана активизация В-системы, в частности увеличение количества В-лимфоцитов в периферической крови.

Наиболее важное значение имеет определение в сыворотке крови специфических и неспецифических биологически активных веществ, отражающих заинтересованность поджелудочной железы в патологическом процессе. Это в первую очередь касается панкреатических протеаз - трипсина, химотрипсина, эластазы и, отчасти, калликреина, активность которых отражает не только тяжесть течения панкреатита, но и уровень общебиологических процессов, например, шока.

Определенный интерес представляет давно известный способ диагностики панкреатита с помощью установления активности а-амилазы в крови и моче. В ряде случаев острых панкреатических атак активность амилазы крови и мочи может быть не изменена. Это можно объяснить тем, что содержание амилазы начинает повышаться через 4-6 ч после начала заболевания и нормализуется через 4-8 ч. Тяжелые формы панкреатита, в частности некрозы паренхимы поджелудочной железы, также не сопровождаются высокой амилазурией. Считают, что на ранних стадиях острого панкреатита определение уровня амилазы в крови более информативно, чем в моче, в то же время амилазурия сохраняется более длительное время.

Преимуществом амилазурической пробы перед исследованием а-амилазы в сыворотке крови является доступность получения мочи и возможность повторения анализа несколько раз. Кроме того, в моче, которую собирают несколько часов, можно обнаружить даже кратковременное повышение содержания амилазы.

Многочисленные методы определения активности амилазы делятся на амилокластические (по определению скорости уменьшения содержания крахмала в пробе) и сахарофицирующие (основаны на определении скорости гидролиза крахмала под влиянием амилазы по приросту редуцирующих сахаров).

Сахарофицирующие методы объемны, менее чувствительны и поэтому не нашли широкого распространения.

Наиболее распространенным амилокластическим методом является определение активности амилазы в крови и моче по Смиту-Роу. Метод основан на фотометрическом определении интенсивности окраски йодом, которая зависит от количества оставшегося нерасщепленного крахмала. В норме активность амилазы в сыворотке крови составляет 80-120 ЕД, а в моче - 200-400 ЕД.

Для определения содержания в моче и крови а-амилазы широко применяется также унифицированный метод Каравея. Нормальные показатели активности фермента в сыворотке крови - 16-30 мг, в моче - до 160 мг крахмала, гидролизованного 1 мл биологической жидкости за 1 ч инкубации при температуре 37°С.

Широко применяют полуколичественный метод Вольгемута, основанный на расщеплении крахмала а-амилазой при использовании серии разведенной мочи методом переката (в каждой последующей пробирке увеличивается разведение в кратное число раз). Его использование оправдано только при остром и хроническом рецидивирующем панкреатитах в приемных отделениях хирургических стационаров. По Вольгемуту амилаза в норме составляет в крови до 32 ЕД, в моче - до 64 ЕД.

Целесообразно также определять активность а-амилазы крови и мочи после стимуляции секреции поджелудочной железы секретином, прозерином, фуросемидом. В стадии ремиссии панкреатита всеми перечисленными методами может быть зарегистрирован нормальный уровень амилазы мочи и крови, а при выраженном фиброзе и атрофических процессах в ткани поджелудочной железы - гипоамилазурия и гипоамилаземия, что свидетельствует о снижении экзокринной функции поджелудочной железы.

Усиленное поступление ферментов поджелудочной железы в кровь («уклонение ферментов») обусловлено нарушением целостности паренхимы поджелудочной железы либо острым застоем секрета на том или ином участке протоков поджелудочной железы. Следует отметить, что при хроническом панкреатите вне стадии обострения концентрация панкреатических энзимов может быть не повышена, а даже снижена.

Выделение амилазы с мочой при остром и хроническом рецидивирующем панкреатитах вызвано, с одной стороны, гиперамилазурией, с другой - подавлением канальцевой реабсорбции. При этом коэффициент клиренс амилазы/клиренс креатинина (амилазокреатининовый клиренс) резко увеличивается. В норме он составляет 1, а при острых панкреатитах может возрастать до 3. Метод определения амилазокреатининового клиренса более чувствителен и специфичен при остром и хроническом рецидивирующем панкреатитах по сравнению с методом выявления активности а-амилазы в крови и моче.